آگاروز کد a9539 سیگما

آگاروز سیگما کد A9539 (Agarose Routine Use)

معرفی و مشخصات فنی آگاروز گرید روتین کد A9539 سیگما آلدریچ

آگاروز کد A9539 سیگما آلدریچ (Sigma-Aldrich Agarose)، یک پلی ساکارید خطی با خلوص استاندارد و گرید بیولوژی مولکولی است که به عنوان ژل پایه در تفکیک، آنالیز و خالص سازی اسیدهای نوکلئیک (DNADNADNA و RNARNARNA) و پروتئین ها کاربرد دارد. این گرید آگاروز به طور ویژه برای آزمایش های روزمره و روتین آزمایشگاهی بهینه سازی شده و به دلیل درصد بسیار پایین ناخالصی های باردار، کمترین میزان پس زمینه (Background) را در رنگ آمیزی با رنگ های فلورسنت ایجاد می کند.

ماتریس متخلخل تشکیل شده توسط آگاروز A9539 تفکیک دقیق قطعات اسید نوکلئیک در محدوده ۱۰۰ جفت باز تا بیش از ۲۰ کیلوجفت باز را با وضوح باند بسیار بالا فراهم می سازد.

جدول مشخصات و پارامترهای تحلیلی (Analysis Note)

مفاهیم کلیدی و پارامترهای کنترل کیفی آگاروز A9539

کیفیت تفکیک قطعات ژنتیکی در این آگاروز بر اساس چهار پارامتر بیوفیزیکی تعریف می شود:

۱. مقدار سولفات و درجه خلوص (Sulfate Content)

سولفات اصلی ترین گروه ناخالصی آنیونی در آگارز طبیعی است. در آگاروز A9539، مقدار سولفات به حداقل رسیده است. هر چه میزان سولفات کمتر باشد، خلوص پلیمر بالاتر بوده و اتصال غیر اختصاصی به اسیدهای نوکلئیک یا مهار آنزیم های پایین دست (مانند لیگازها و پلیمرازها) رخ نمی دهد.

۲. پدیده الکترواندواسمز (Electroendosmosis - EEO)

در میدان الکتریکی، گروه های باردار منفی متصل به ماتریس آگاروز ثابت می مانند، در حالی که کاتیون های محلول به همراه پوسته هیدراته خود به سمت کاتد حرکت می کنند. این جریان مایع داخلی (EEO) می تواند حرکت طبیعی DNA به سمت آند را کند یا ناهموار کند. مقدار کنترل شده EEO در کد A9539 تضمین کننده حرکت صاف و مستقیم باندها است.

۳. استحکام مکانیکی ژل (Gel Strength)

استحکام ژل نشان دهنده مقدار نیروی فیزیکی بر حسب گرم بر سانتی متر مربع است که ژل بدون شکست ساختاری تحمل می کند. این ویژگی باعث می شود حتی در غلظت های پایین (مانند ژل ۰.۷ یا ۰.۸ درصد)، ژل حین انتقال به تانک یا مرحله برش باند (Gel Extraction) پاره نشود.

۴. پدیده هیسترزیس و نقطه تشکیل ژل (Gel Point vs Melting Point)

آگاروز رفتار حرارتی منحصر به فردی دارد؛ دمایی که در آن محلول آگاروز هنگام سرد شدن شبکه ژلی تشکیل می دهد (Gel Point) به مراتب پایین تر از دمایی است که ژل دوباره ذوب می شود (Melting Point). این ویژگی زمان کافی برای ریختن ژل در سینی کستینگ را بدون انجماد ناگهانی فراهم می کند.

جدول مقایسه کاربردی: آگاروز روتین در برابر سایر گریدهای تخصصی

کاربردهای پژوهشی و آزمایشگاهی

۱. الکتروفورز تحلیلی و تفکیک ژل اسیدهای نوکلئیک

جداسازی محصولات واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، هضم آنزیمی وکتورها و بررسی یکپارچگی نمونه های استخراج شده DNA ژنومیک و پلاسمید و RNA.

۲. تکنیک های بلاتینگ تخصصی (Southern & Northern Blotting)

انتقال کارآمد باندهای ژنتیکی تفکیک شده از ژل به غشاهای نایلونی یا نیتروسلولز با حفظ وضوح فضایی قطعات جهت هیبریداسیون های تشخیصی.

۳. روش های ایمونولوژی و انتشار شعاعی

انجام تست های ایمنی سنجی مبتنی بر رسوب ژلی شامل روش اوشترلونی (Ouchterlony Double Immunodiffusion) و روش سنجش ایمنی انتشار شعاعی (Radial Immunodiffusion - RID) به دلیل ساختار شفاف و بدون تداخل زمینه ای ژل.

۴. تصویربرداری ژل با حداقل نویز نوری

سازگاری با متدهای حساس رنگ آمیزی ژل شامل اتیدیوم بروماید (Ethidium Bromide)، سایبر گرین (SYBR Green)، سایبر گلد و سایر رنگ های اینترکالیتور ایمن با کمترین فلورسانس پس زمینه.

راهنمای آماده سازی ژل اگاروز در بافرهای الکتروفورز

انتخاب بافر: از بافر TAE (برای قطعات بزرگ و استخراج دی ان ای) یا بافر TBE (برای قطعات کوچک و زمان اجرای طولانی) استفاده شود.

• حرارت دهی یکنواخت: ارلن حاوی سوسپانسیون در مایکروویو حرارت داده شود و به صورت دوره ای با احتیاط همزده شود تا تمامی دانه های آگاروز ذوب شده و مایع کاملا زلال گردد.
• دمای ریختن ژل: پیش از اضافه کردن به سینی کستینگ، دمای محلول تا حدود ۵۰ الی ۵۵ درجه سانتی گراد کاهش یابد تا از تاب برداشتن تانک و سینی ژل جلوگیری شود.

ثبت سفارش و خرید آگاروز سیگما A9539

جهت استعلام موجودی، دریافت سرتیفیکیت آنالیز کیفی (CoA) و خرید آگاروز مخصوص کارهای روتین کد A9539 سیگما آلدریچ در بسته بندی های ۱۰، ۲۵، ۵۰، ۱۰۰، ۲۵۰ و ۵۰۰ گرمی، با بخش فروش مواد و معرف های بیولوژی مولکولی تماس حاصل نمایید.